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游离脂肪酸对非洲绿猴肾细胞凋亡的影响

发布时间:2021-09-24浏览:80次

  非洲绿猴肾细胞被成功的用来培养狂犬病疫苗、乙脑疫苗等多种疫苗,在非典期间又为研究冠状病毒做出贡献,在医药研究种广泛应用。
  非洲绿猴肾细胞探讨脂肪酸对细胞生长的影响。利用不同种类不同浓度脂肪酸处理体外培养细胞,利用光镜观察细胞形态,后经Hoechst/PI荧光染色和染色体DNA梯度电泳观察细胞形态改变并确定细胞凋亡;同时应用蛋白免疫印迹反应检测淘亡相关Bc1-2、Bax、Fas、P53和Caspase-3蛋白质表达水平。实验结果:
  (1)光镜观察显示:细胞经脂肪酸处理后有形态上的改变,细胞产生不同程度的破损,这种损坏程度随脂肪酸浓度递增而加强。
  (2)Hoechst/Pl染色表明:饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸都可剂量依赖性的引起Vero细胞凋亡。随浓度升高,PI着色加深,染色质边集;Hoechst着色渐淡。
  (3)DNA凝胶电泳显示:经脂肪酸处理的细胞DNA呈明显的梯度分子条带,表现为典型的凋亡现象,此现象随处理浓度加大而加重。
  (4)Western-blot分析结果表明:脂肪酸处理的细胞中,Bcl-2、Bax、Fas、Caspase-3蛋白表达量发生改变,其中Bax、Fas蛋白表达量随浓度增加而显著上调,同时,Bc1-2蛋白含量有所降低;另外,饱和脂肪酸处理组中P53蛋白表达并无太大差异,而不饱和脂肪酸组P53含量以剂量依赖性上升。
  实验结果表明,随着脂肪酸浓度的升高,Vero细胞的凋亡程度有所增加,有明显凋亡现象。由于Bcl-2、Bax、Fas、Caspase-3和P53蛋白表达发生变化,提示,这些相关基因在脂肪酸诱导的Vero细胞凋亡过程中起到了重要的作用。

 

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