玩转不同类型细胞传代方法

根据不同细胞采取不同的培养细胞传代方法。悬浮生长的细胞可以用直接吹打或离心分离后传代，或自然沉降法吸除上清后，再吹打传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁生长的细胞用直接吹打即可传代。

细胞传代培养时常用的酶为胰蛋白酶，它可以破坏细胞与细胞、细胞与培养瓶之间的细胞连接或接触，从而使它们之间的连接减弱或*消失。经胰蛋白酶处理后的贴壁细胞在外力（如吹打）的作用下可以分散成单个细胞，再经稀释和接种后就可以为细胞生长提供足够的营养和空间，达到细胞传代培养的目的。

因悬浮生长细胞不贴壁，故传代时不必采用酶消化方法，而可直接传代或离心收集细胞后传代。直接传代即让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后，将上清吸掉1/2~2/3，然后用吸管吹打形成细胞悬液后，再传代。悬浮细胞常采用离心方法传代，即将细胞连同培养液一并转移到离心管内，800~1 000 r/min离心5 min，去除上清，加新的培养液到离心管内，用吸管吹打形成细胞悬液，然后传代接种。

半悬浮细胞部分呈现贴壁生长现象，可不经消化处理直接吹打使细胞从瓶壁上脱落下来，而进行传代。但这种方法仅限于部分贴壁不牢的细胞，如SP2/0细胞等。直接吹打对细胞损伤较大，细胞也常有大量丢失，因而绝大部分贴壁生长的细胞均需消化后，才能吹打传代。

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