您的位置: 首页 > 技术文章 > 解析:细胞生长缓慢的原因

解析:细胞生长缓慢的原因

发布时间:2022-10-14浏览:171次

就一个实验室而言无论运作的多么好,总会因为革新技术或拓展方向二影响原来的流程,从而产生各种各样的问题。有些地方错误的操作有可能带来严重的后果,那么今天主要列举细胞生长缓慢的两大原因。




01




图片

培养体系出现问题


01

检查你所培养的细胞是否存在污染。

(1)如果培养细胞未添加抗生素,细胞污染则是不可避免的。

① 用肉眼和显微镜进行检查。

② 如果细胞被污染则要弃掉。

(2)由于支原体污染不容易觉察到,因此必须定期检测。

(3)检测可能污染的途径和原因。



02

检查你用于培养细胞的培养基和血清(例如:是否批次不同或厂商不同)。如果你常规使用的是粉剂或10×储存液,而现在购买的培养基更换为1×液体,而随后证明问题就出自于此。



03

如果问题与培养基无关,那么很可能还是细胞的问题。

(1)复苏另一支冻存的细胞,并且与正在培养的细胞加以比较。两种细胞的培养应分开,以免在培养之初就产生污染。随后按(2)~(4)步的方法做排查。


(2)对传代培养的细胞进行计数,并绘制生长曲线,与以前培养该细胞的资料进行比较,检查是否有下列改变:

① 传代时是否接种密度过低。

② 细胞传代是否过于频繁。

③ 传代前细胞平台期是否过长。


(3)是否更换了胰蛋白酶或其他分离剂的批号,检查批号和供货商。


(4)是否细胞分离过程中严重损伤了细胞,应检测:

① 胰蛋白酶(其他消化试剂)消化时间是否过长。

② 消化液的浓度和活性是否过高、过强。

③ 胰蛋白酶消化时,孵箱温度是否过高。

④ 吹打消化细胞时是否过于用力。

⑤ 细胞是否对 EDTA过于敏感(如果添加了EDTA)。

⑥ 胰蛋白酶稀释是否有误。

⑦ 是否使用了一批劣质的胰蛋白酶消化液。




02




检查共用的设备和试剂


图片



温度和孵箱湿度



温度设定不准

01


a 自动调温器损坏。

b 开关孵箱门过于频繁。

c 孵箱门未关紧。

d 风扇损坏造成散热不均。


孵箱湿度不能维持

02


a 水盘中未加水。

b 孵箱有渗漏。

c 开关孵箱门过于频繁。

d 在Petri培养皿中放置一定量的PBS,每日称重,以检查蒸发率。


孵箱的CO2浓度不准

03


a 开关孵箱门过于频繁。

b CO2控制器出现问题。




图片


产/品/推/荐


图片





产品名称:BEAS-2B(人正常肺支气管上皮细胞)

货号:SNL-203



产品名称:特级胎牛血清(来自南美纯正血源)

货号:SNS-002



产品名称:胰酶(含EDTA)

货号:SNT-002


公 司 简 介

武汉尚恩生物技术有限公司坐落于武汉东湖区光谷生物城,专注于细胞及系列产品的研发、生产和服务,公司建有标准化GMP实验室、动物房,已整体通过ISO 9001:2015质量管理体系认证,获得企业、3551人才、瞪羚企业、科技小巨人等多项荣誉。  


公司主要研发生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础培养基、*培养基、辅助试剂等系列产品,提供细胞及培养配套产品一站式采购;细胞库冻存细胞系500余种,同时通过不间断引种细胞扩大丰富细胞种类;公司还提供人源细胞系的STR鉴定、大小鼠的种属鉴定服务等。  


公司细胞业务覆盖国内各大高校生物实验室、生物研究机构及一些生物科研、诊断、制药公司,不断为广大科研工作者提供优质的产品和服务!尚恩生物—您专业的细胞供应商!



END




 

联系我们
  • QQ:1242926414
  • 邮箱:1242926414@qq.com
  • 传真:86-027-87800889
  • 地址:武汉市东湖高新区高新大道666号光谷生物城创新园C6栋

扫一扫,关注公众号

©2022 武汉尚恩生物技术有限公司 版权所有    备案号:鄂ICP备2020018368号-2    技术支持:化工仪器网    Sitemap.xml    总访问量:50857    管理登陆