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SV-HUC-1细胞复苏平衡后怎样判断其状态

更新时间：2023-03-02浏览：425次

细胞基本信息

细胞名称：SV-HUC-1(人输尿管上皮永生化细胞)

细胞别称：HUC-1; SV-HUC; SVHUC

细胞类型：上皮细胞

生长特性：贴壁

培养条件：F12K+10% FBS+1% P/S

培养环境：空气，95%；二氧化碳 (CO2)，5%

细胞简介：SV-HUC-1细胞是11岁男性的正常输尿管组织用SV40病毒转染建株的，细胞尿上皮角蛋白、SV40 T抗原阳性。SV-HUC-1细胞经反复用非洲绿猴肾细胞平板测试检测传染性SV40，结果都呈阴性，但在胁迫(如曝露于化学试剂)下可能激活SV40病毒。SV-HUC-1细胞可以用于3D细胞培养。

SV-HUC-1细胞正常生长形态照片（40x、100x）

SV-HUC-1细胞操作实例

客户提问：

SV-HUC-1细胞刚收到的复苏细胞平衡后麻烦看下状态

小尚回答：

目前从图片上观察细胞状态良好，密度在80%左右，平衡完成后及时消化传代，初次传代建议1:2传代。该细胞消化时间较长，注意延长消化时间。对于消化这步，客户如果对该细胞经验不多，无法准确掌控胰酶作用时间，建议客户按照下述操作：

胰酶首先复温到室温后加入细胞，放入37度培养箱，然后每隔30秒，即吹打下细胞（此时吹打细胞应尽量轻柔，不能强行将细胞吹下，否则细胞可能出现机械损伤），如果能够吹打散细胞，说明细胞消化完成可以终止消化，如果30秒吹打不下，再等30秒重复操作。

消化完成后加3-4ML培养基终止消化，混匀细胞，收集细胞悬液900-1000rpm离心3min，弃上清。再加5ml PBS重悬细胞，再离心后，用培养基重悬接种到新的培养皿。第二次PBS重悬是为了去除碎片，如果平时碎片比较少，传代时可以省略PBS重悬的步骤；如果碎片很多，建议PBS多洗一次。

传代24h后可以观察细胞，若死亡细胞及碎片较多建议PBS润洗下贴壁的细胞，再加新的培养基继续培养。

注意事项

SV-HUC-1细胞对pH值敏感，注意加多些培养基培养，培养变黄后及时换液。平时培养建议T25瓶加10ml培养基，10cm皿加12-15ml，密度60%以下2-3天换液一次，密度60-80%时隔一天换液一次，80%以上每天换液。以维持相对稳定的培养条件。特别是密度高的时候，留意培养基是否变黄，培养基变黄要及时换液。

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