如何正确使用无血清冻存液冻存MG63细胞？

细 胞 基 本 信 息

细胞名称： MG63(人骨肉瘤细胞)

细胞别称： M-G63；MG63

细胞货号： SNL-229

生长特性： 贴壁

培养条件： DMEM+10% FBS+1% P/S

培养环境： 空气，95%；二氧化碳 (CO2)，5%

细胞简介： MG63细胞是从一名患有骨肉瘤的14岁白人男性患者的左股骨中分离出来成纤维细胞形态的细胞，表达TGF-β RI、TGF-β RII，使用聚肌苷-多肽酸、环己酰亚胺和放线菌素D可以诱导MG63细胞产生大量干扰素。MG63细胞可以用于3D细胞培养，也是一种合适的转染宿主。

MG63细胞正常生长形态照片

提问

MG63可以用无血清冻存液冻存吗?

回答

可以使用。不同品牌的冻存液冻存效果可能不一样，建议冻存后次日复苏一管检测细胞活率及状态没有问题后再将剩余冻存细胞放置液氮中保存。

注 意 事 项

不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态

无血清冻存液的使用方法分享：

选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。

1.按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于离心管中；

2.按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数；

3.取所需细胞数的细胞悬浮液置于离心管中，900rpm离心3min，弃上清；

4.加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为1x106至2x106 cells/ml，缓慢地混合均匀，制成细胞混合液；

5.将离心管中的细胞混合液分装于已标示细胞名称的冻存管中；

6.直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，过夜冷冻保存，第二天移至-196℃液氮罐。