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干货!!SK-LU-1(人低分化肺腺癌细胞)传代标准操作流程

更新时间:2023-02-20浏览:674次


 细胞基本信息

 

 

--细 胞 基 本 信 息---

细胞名称: SK-LU-1(人低分化肺腺癌细胞)

细胞别称: SK-Lu-1;SK LU 1;SK-Lu1;SK-LU1;SKLU-1;SKLU1;SKLU01

细胞货号: SNL-229

生长特性: 贴壁

培养条件: DMEM+10% FBS+1% P/S

培养环境: 空气,95%;二氧化碳 (CO2),5%

细胞简介: SK-LU-1细胞来源于一名64岁患有肺腺癌(III级)的白人女性。SK-LU-1细胞在免疫耐受大鼠中是致瘤的。SK-LU-1细胞支原体污染于1971年被发现并消除,可以用于3D细胞培养。

 

 

SK-LU-1细胞正常生长形态照片

 

 

 

 SK-LU-1(人低分化肺腺癌细胞)的特点

 

 


1、细胞颗粒感较重

细胞传代培养时细胞内黑点及细胞外颗粒较多,建议使用优质血清及培养基培养细胞;


2、传代、复苏注意细胞状态

细胞消化或者复苏操作不当容易导致细胞死亡裂解产生大量碎片及颗粒,进而影响活细胞状态,注意消化或复苏过程尽量轻柔,严格控制消化时间和复苏操作规范,传代或复苏24h后建议观察细胞,建议换液一次去除死亡细胞;

 

 

细胞收货攻略


常温细胞

 

1. T25瓶收货后,拆开外包装,用75%酒精消毒T25瓶表面,放37℃培养箱静置2-4h;

2. 吸走大部分培养基并留10-12 ml,显微镜下拍照保存细胞状态照片,观察细胞密度,若细胞密度大于80%即可按比例传代(传代比例建议1:2),若细胞密度低于70%可以留10-12 ml继续培养至细胞密度80%以上再进行传代培养;

 


冻存细胞

1. 细胞收货后尽快开箱检查,若干冰充足可以取出细胞迅速置于-80℃冰箱(2-3天内复苏)短期保存或液氮中长期保存,若干冰挥发建议立即复苏细胞并联系销售人员解决;

2. 冻存细胞建议尽快复苏一管培养检查,以免超出售后期,复苏步骤参考复苏攻略;

3. 复苏一管细胞出现异常及时联系销售人员,在专业技术支持的指导下进行下一步操作;

 

 

Tips:

1. 细胞收货出现漏液、培养瓶破损、干冰挥发等异常情况时,及时拍照联系销售人员;

 

2. 该细胞贴壁生长,一般T25瓶运输过程中较少出现大量细胞脱落并聚团的情况,少量细胞脱落是正常状态,不影响细胞生长,按正常操作步骤继续培养即可。

 

3. 尚恩生物T25瓶发货的细胞内含对应细胞的培养基,可以收集原装培养瓶内培养基经1500rpm离心5min后,取上清于4℃保存用于后续细胞培养;

 

 

细胞传代攻略

 

 

1. 先尽量吸干净T25瓶原培养基,再加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;

2. T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层,将培养瓶放入37度培养箱消化;

3. 消化到细胞间隙变大,但未脱落时加2-3ml培养基终止胰酶消化;

4. 混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;

5.加新的培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里,补足培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;

 

 

Tips:

1. 对于消化细胞程度,客户如果经验不多,无法准确掌控胰酶作用时间,建议客户按照下述操作:胰酶首先复温到室温后加入细胞,放入37度培养箱,然后每隔30秒,即吹打下细胞(此时吹打细胞应尽量轻柔,不能强行将细胞吹下,否则细胞可能出现机械损伤),如果能够吹打散细胞,说明细胞消化完成可以终止消化,如果30秒吹打不下,再等30秒重复操作直至能够轻柔的吹下细胞;

 

2. T25瓶加10-12ml培养基,10cm皿加12-15ml,2-3天换液一次。

 

3. 细胞收货后传代建议按1:2传代,后续培养可以视具体细胞生长状态和密度情况决定传代比例;

 

4. 传代后24h建议观察细胞并换液一次去除死亡细胞;



文献引用

 

图片1.png 

 

 

CAT#:            SNL-492

Product name:   SK-LU-1(人低分化肺腺癌细胞)

Date:            2022/12/23

Journal:         Nature Communications

Impact Factor:   17.694

Title:        

USP5-Beclin 1 axis overrides p53-dependent senescence and drives Kras-induced tumorigenicity

PMID:           PMID: 36528652

 

 


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