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a549细胞的常规培养方法

更新时间:2023-06-15浏览:2066次

  A549细胞是一种人类非小细胞肺癌细胞系,是由一种肺腺癌患者的癌细胞所产生的。这个细胞系的主要特性是在无血清条件下生长,它具有许多相似的特征,例如:大多数非小细胞肺癌(NSCLC)患者中观察到的突变,灵敏性反应和恶性肿瘤学表型。研究表明,在这种细胞系中还发现了类似于肺癌患者的一些改变,包括对抗肿瘤药物的耐药性和某些基因的过度表达,这些都使得它成为了一个非常有用的疾病模型。
 
  由于它与非小细胞肺癌患者的相似性,因此可以用来更好地理解这种癌症的生物学特性以及药物敏感性。同时,这些细胞也被用于评估肺癌治疗方案的有效性。广泛地应用于开展高通量的药物筛选,在这个模型中,科学家可以通过测试不同的化合物和药品来评估它们对细胞增殖和细胞凋亡的影响。
 
  a549细胞的常规培养方法:
 
  1.培养基:常用的培养基包括DMEM(Dulbecco'smodifiedEagle'smedium)和RPMI(RoswellParkMemorialInstitute)1640等。这些培养基中均含有氨基酸、糖类、维生素、微量元素等营养物质,以满足其生长需要。
 
  2.细胞解冻:将冻存的A549细胞取出,用无菌PBS(磷酸盐缓冲液)洗涤细胞,将细胞孵育在37℃的孵化箱中解冻。解冻后的细胞可通过离心洗涤去除培养基中的DMSO(二甲基亚砜)。
 
  3.细胞传代:当培养皿中的细胞密度达到80%左右时,可通过胰蛋白酶等消化酶将细胞从培养皿底部脱离,并分装到新的培养皿中。通常情况下,每隔2-3天进行一次细胞传代。
 
  4.培养条件:在37℃的CO2孵化箱中培养,CO2浓度通常为5%。生长时需要保持适宜的湿度和营养物质供应,并定期更换培养基。
 
  需要注意的是,培养过程中需保持无菌环境,避免细菌和真菌等外源性污染。同时,需要注意细胞密度的控制,过高或过低的密度都会影响细胞生长和实验结果。
 
  a549细胞可以冷冻保存,方法如下:
 
  1.用离心管收集,加入相应细胞培养基并旋转离心,去除培养基。
 
  2.加入含10%DMSO的冻存液,混合均匀。
 
  3.将细胞悬液转移到专门的冷冻管中,标记好样本编号和日期。
 
  4.将冷冻管放入冰箱中,以4°C的速率降温,直到0°C。
 
  5.将冷冻管放入液氮管中,以-1°C/min的速率降温到-80°C。
 
  6.将细胞长期存储在液氮罐中,使用前可快速复苏。

 

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