双抗(青链霉素混合液)在细胞培养中主要起到抑制细菌生长、避免细胞污染的作用。具体来说,其作用可以从以下几个方面进行详细阐述:
一、抗菌机制
青霉素:青霉素主要通过阻碍细菌细胞壁的合成来发挥作用。细胞壁是细菌维持其形态和生存的重要结构,青霉素能够干扰细胞壁合成过程中的关键酶,导致细胞壁合成受阻,从而使细菌细胞因内部渗透压失衡而破裂死亡。青霉素对革兰氏阳性菌有较好的抑制作用。
链霉素:链霉素则作用于细菌的核糖体,通过与细菌核糖体30S亚基结合,阻断蛋白质的合成。蛋白质是细菌生命活动的基础,阻断其合成会导致细菌无法维持正常的生命活动而死亡。链霉素对革兰氏阳性和阴性菌均有一定的抑制作用。
二、联合使用效果
青霉素和链霉素的抗菌谱虽然有所不同,但二者联合使用可以扩大抗菌范围,起到协同作用。自然环境下(不考虑人为产生的抗药性),对青霉素不敏感的微生物绝大多数对链霉素敏感,反之亦然。因此,二者联合使用可以控制几乎全部常见细菌,有效避免细胞培养过程中的细菌污染。
三、使用注意事项
浓度配置:双抗通常配置成100x的母液保存,配置培养基时按使用浓度添加到培养基中。不同实验室或不同细胞系对双抗的敏感性可能有所不同,因此需要根据实际情况调整双抗的使用浓度。
无菌操作:双抗作为抗生素,其使用过程中需要严格遵守无菌操作规范,以防止引入新的污染源。
存储条件:双抗应保存在适当的温度条件下,避免反复冻融和高温暴露,以保证其活性和稳定性。
使用期限:配置好的培养基应尽快使用,避免长时间放置导致细菌污染或双抗失效。