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raw264.7细胞是一种鼠源的巨噬细胞系

发布时间:2022-08-03浏览:86次

  raw264.7细胞是一种鼠源的巨噬细胞系,RAW264.7细胞贴壁快,形态以类圆形和不规则为主,一般1~2个核,少数有3个核,胞浆伸展时胞体较大。细胞贴壁紧,胰酶-EDTA难以消化,需要多次消化吹打,也可采用细胞刮法。
 
  raw264.7细胞培养注意事项:
 
  1、具有很强的吞噬能力,当吞噬抗原后,细胞会释放趋化因子,进一步促进细胞伸出伪足,增强粘附攀爬能力。细胞吞噬抗原过多、培养环境恶劣都会促进该细胞呈现梭形、长梭形,镜下会看到具有细长伪足的小细胞被类似上皮的梭形大细胞取代。
 
  2、每次传代都很难消化下来。用力过大则对细胞损伤较大,这种细胞传代时接种密度要大,否则容易使巨噬细胞向终末细胞分化,细胞变成长形,并且不能回复,这是培养这种细胞时需要注意的问题。
 
  3、生长时喜欢结伴。正常生长状态应该是一小片一小片的生长,片片之间不连接,等到长到更多更密的时候会连成大片,并且会叠加成层。所以,要很好地控制好细胞的生长速度,不要等到叠加成层的时候再传代。
 
  4、传代后贴壁时间较短,半小时就能贴很多,刚贴壁是细胞呈圆形,折光度很好,镜下观察如小珍珠状一个个地散落于瓶底面。生长一段时间后,部分细胞会变成类似四角形,伸出伪足之类的。这个时候就是提醒你注意传代了,这部分细胞如再不传代,很容易就老化掉。
 
  raw264.7细胞破骨细胞分化:在RANKL的诱导下,RAW264.7细胞可以分化为成熟的破骨细胞,此时应用破骨细胞特异性的抗酒石酸酸性磷酸染色(TRAP染色),在有成熟破骨细胞的部位可见红色的阳性反应,所以一般认为RAW264.7是一种前破骨细胞。 向破骨细胞的分化是一个NF-kb通路依赖的过程,先前的大量研究表明,NF-kb通路受到抑制时,RAW264.7细胞不能向破骨细胞的分化。

 

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