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hela细胞复苏实验步骤

更新时间:2022-09-08浏览:593次

  hela细胞(HeLa cell line)是生物学与医学研究中使用的源自一位名叫Henrietta Lacks美国妇女的子宫颈癌细胞的细胞系。这名美国妇女在1951年死于该癌症。为了让Lacks保持匿名,此细胞株原宣称是依[Helen Lane]命名。海拉细胞系被视为[不死的」(即,不同于其他一般的人类细胞,此细胞株不会衰老致死,并可以无限分裂下去),至今都被不间断的培养。此细胞系跟其他癌细胞相比,增殖异常迅速。海拉细胞系被George Gey分送给众研究单位(并未通知Lacks本人也未得到她的许可),并用作癌症细胞模型(model cancer cells)研究。
 
  hela细胞复苏实验步骤:
 
  1.从零下80℃冰箱或者液氮罐中取出冷冻管,迅速投入37℃水浴中,使其融化(1分钟左右)。
 
  2.培养基缓慢稀释至原体积的10倍以上。
 
  3.低速离心10分钟,吸去上清,加入新鲜的培养基培养刚复苏的细胞。
 
  4.六个小时细胞*贴壁后吸去含有冻存液的培养基并换成*培养基。
 
  hela细胞传代实验步骤:
 
  1.取密度80%左右的Hela细胞,吸去旧的培养基,用PBS或者Trypsin消化液润洗细胞以减少残留的血清对Trypsin的抑制作用。
 
  2.吸去PBS或者Trypsin,加入Trypsin消化液,于37℃消化2~4分钟,于倒置显微镜下观察,当细胞之间出现间时或者变圆时,吸掉Trypsin消化液。(也可以直接加入适量含血清的新鲜培养基终止Trypsin的消化作用并进行吹打分离细胞,消化细胞时应静置以避免漂浮的细胞滚动成团)
 
  3.加入适量新鲜培养基,用移液器上下吹打数次打散细胞团块以尽可能形成单细胞悬液,吹打均匀后,按照稀释比例转移至新的培养瓶中,补充*培养基并以正常培养条件培养。

 

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