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细胞培养基的常见成分及功能

更新时间:2022-12-15浏览:703次

  细胞培养基都需要相似的基本营养物质,对维持生命和细胞生长至关重要。基于细胞的化学组成,水,各种来源的碳、氮和磷酸盐,氨基酸,脂肪酸,维生素,微量元素,和盐浓度都提供所需的浓度,以满足细胞的生长,。根据营养物质的消耗速率,需要补充关键组分以保持细胞的高活力,并延长培养时间。虽然已经开发出了适合多种细胞类型的培养基,包括微生物,植物,昆虫和哺乳动物,不同的培养基在基本营养成分方面可能大体相似,但本章节主要关注无血清、化学成分限定的CHO细胞培养基,主要是为了重组抗体的表达。
 
  细胞培养基的常见成分及功能:
 
  1.能量来源
 
  每一个生长培养基都需要碳源,以供细胞新陈代谢。碳源通常是葡萄糖,但也可以是其他糖类,如半乳糖、己糖、果糖或其他碳源(如丙酮酸,谷氨酰胺)。葡萄糖通常以终浓度为5.5mM的含量添加,大约等于人体血液中的葡萄糖水平。然而,你可以购买葡萄糖浓度变化范围很广的培养基来满足你的具体需求。你甚至可以购买不含葡萄糖的培养基,然后自己定制浓度,模拟高糖的糖尿病状况,或者研究低糖应激反应。
 
  2.缓冲液
 
  细胞需要一种特殊的pH值从7.2到7.4,否则它们无法发挥细胞功能,以供生长和存活。在二氧化碳含量较高的培养器中,二氧化碳与水发生反应,产生氢离子,使培养基酸化。为了中和二氧化碳产生的酸度,并在培养基中保持pH值,大多数培养基都使用化学缓冲系统。然而,一些缓冲方法会干扰细胞生长。
 
  哺乳动物细胞常见的缓冲系统是碳酸氢钠,生物影响小。碳酸氢钠与氢离子反应生成二氧化碳,隔离它们以保持pH值。然而,碳酸氢钠的一个缺点是,它在生理pH值上不是缓冲效果。为了避免这个问题,研究人员经常使用替代品,如HEPES,增加某些培养基类型的缓冲能力。

 

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