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NRK 52E细胞大鼠肾细胞NRK 52E国内厂家

简要描述:NRK 52E细胞大鼠肾细胞NRK 52E国内厂家
细胞名称大鼠肾细胞
细胞别称NRK-52E; NRK 52E; NRK52E; NRK clone 52E; Normal Rat Kidney-52E; NRK-E52
细胞货号SNL-027
细胞种属大鼠
生长情况贴壁

  • 产品型号:SNL-027
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2021-08-04
  • 访  问  量:25
详细介绍
品牌自营品牌CAS详见说明书
分子式详见说明书纯度详见说明书
分子量详见说明书货号SNL-027
规格T25瓶供货周期现货
主要用途实验应用领域化工,生物产业,能源

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NRK 52E细胞大鼠肾细胞NRK 52E国内厂家

NRK 52E细胞大鼠肾细胞NRK 52E国内厂家

------尚恩生物 I8627859203-------

一、细胞基本属性
细胞名称大鼠肾细胞
细胞别称NRK-52E; NRK 52E; NRK52E; NRK clone 52E; Normal Rat Kidney-52E; NRK-E52
细胞货号SNL-027
细胞种属大鼠
生长情况贴壁
培养条件H-DMEM+10%FBS+1%双抗
培养环境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期2-3天
培养基体积T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建议)或92%完全培养基+8%DMSO(高手建议);
冻存规格200-300万/ml,1ml每管
冻存方法1. 离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3. 将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

处理步骤T25瓶冻存管
1快递保存温度室温液氮长期保存或-80度3天以内
2初步平衡T25瓶表面消毒后,放37度培养箱平衡复温2h以上无须平衡,直接放入-80冰箱或者液氮罐保存
3处理方式吸走大部分培养基,留10-12ml培养基,拍照并观察细胞。密度80%以上即可吸走培养基消化传代,若密度低于80%可以留10-12 ml继续培养至细胞密度80%以上37度水浴摇晃尽快融化细胞,直接在冻存管内将细胞离心。离心转速以离心力150g(约900rpm)左右,1min为宜,弃上清,沉淀用新鲜培养基重悬后接种到10cm培养皿,显微镜下观察细胞并拍照,24h后换液一次
4接种方式T25传代第①次建议1:2传代,即瓶T25传成两瓶一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
5注意事项若细胞出现漂浮,T25瓶不开封,放至37度培养箱过夜,若细胞贴壁即说明活性正常,按正常操作消化传代即可;若未贴壁,收集细胞培养基离心后,将细胞重悬接种到新的培养瓶中,同时原瓶还贴壁的细胞加培养基继续培养
发货T25瓶装满大约有75ml培养基,可以收集起来,1500rpm离心5min后,取上清4度保存,用于培养细胞,以平稳过渡到客户自己的培养基
收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存,以上情况及时反馈
干冰发货的细胞只能在-80保存3天左右,长时间保存会出现活性下降。干冰发货均为两支,客户先复苏一支,若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户同时复苏两支均状态不佳,我方将不提供免费售后服务



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