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CAL27人舌鳞癌细胞贴壁

简要描述:CAL27人舌鳞癌细胞贴壁
细胞名称:人舌鳞癌细胞
细胞别称:Cal-27; CAL 27; Cal 27; CAL27; Cal27; Centre Antoine Lacassagne-27
细胞货号:SNL-179
细胞种属:人
生长情况:贴壁

  • 产品型号:SNL-179
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2021-08-24
  • 访  问  量:69
详细介绍
品牌自营品牌CAS详见说明书
分子式详见说明书纯度详见说明书
分子量详见说明书货号SNL-179
规格T25瓶供货周期现货
主要用途实验应用领域化工,生物产业,能源

637626500720363713959.jpgCAL27人舌鳞癌细胞贴壁

CAL27人舌鳞癌细胞贴壁

---尚恩生物 186278592O3---

一、细胞基本属性
细胞名称:人舌鳞癌细胞
细胞别称:Cal-27; CAL 27; Cal 27; CAL27; Cal27; Centre Antoine Lacassagne-27
细胞货号:SNL-179
细胞种属:人
生长情况:贴壁
培养条件:H-DMEM+10%FBS+1%双抗
培养环境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期2-3天
培养基体积T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格200-300万/ml,1ml每管
冻存方法1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案


收货处理方式(T25瓶/冻存管)

T25】

①快递保存温度:室温

②初步平衡:T25瓶表面消毒后,放37度培养箱平衡复温2h以上

③处理方式:吸走大部分培养基,留10-12ml培养基,拍照并观察细胞。密度80%以上即可吸走培养基消化传代,若密度低于80%可以留10-12 ml继续培养至细胞密度80%以上

④接种方式:T25传代第①次建议1:2传代,即瓶T25传成两瓶

⑤注意事项:若细胞出现漂浮,T25瓶不开封,放至37度培养箱过夜,若细胞贴壁即说明活性正常,按正常操作消化传代即可;若未贴壁,收集细胞培养基离心后,将细胞重悬接种到新的培养瓶中,同时原瓶还贴壁的细胞加培养基继续培养
发货T25瓶装满大约有75ml培养基,可以收集起来,1500rpm离心5min后,取上清4度保存,用于培养细胞,以平稳过渡到客户自己的培养基

【冻存管】

①快递保存温度:液氮长期保存或-80度3天以内

②初步平衡:无须平衡,直接放入-80冰箱或者液氮罐保存

③处理方式:37度水浴摇晃尽快融化细胞,直接在冻存管内将细胞离心。离心转速以离心力150g(约900rpm)左右,1min为宜,弃上清,沉淀用新鲜培养基重悬后接种到10cm培养皿,显微镜下观察细胞并拍照,24h后换液一次

④接种方式:一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶

⑤注意事项:收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存,以上情况及时反馈
干冰发货的细胞只能在-80保存3天左右,长时间保存会出现活性下降。干冰发货均为两支,客户先复苏一支,若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户同时复苏两支均状态不佳,我方将不提供免费售后服务

特殊情况:

1.若培养瓶或者冻存管出现破碎或漏液情况,及时拍照联系销售反馈,按指导进行进一步处理。若只是外包装破损一般不影响培养瓶和冻存管,请放心使用。

2.若无法观察到细胞,建议收集细胞培养基,1200rpm离心5min,观察细胞沉淀量,并用少量培养基重悬沉淀后,取部分悬液放到计数板或者载玻片上观察细胞。

3.部分细胞增殖较快,发货细胞量较多时,培养基可能出现颜色变黄现象。继续培养使用此类培养基时,需要及时观察培养基颜色变化,缩短培养基换液周期,并每瓶多加2-3ml培养基。

4.收货当天不处理细胞时,T25瓶可以消毒拆封口膜后不拧开瓶盖放37度培养箱静置过夜,但不建议超过24h;冻存管可以直接放液氮长期保存或-80度3天以内,必须一周内复苏一只培养检查,否则将超过一周售后期。

 

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