bv2细胞是神经胶质细胞的一种,是中枢神经系统中的一道也是主要的一道免疫防线。中风引起的脑损伤会激活小胶质细胞,使小胶质细胞极化为M1型和M2型。M1小胶质细胞可以产生高水平的促炎细胞因子,加剧急性脑损伤,而M2型表现出对大脑具有神经保护作用,改善中风后的症状。然而,M2小胶质细胞介导神经保护的潜在机制仍不清楚。有文献表明,间充质干细胞来源的外泌体有利于缺血性卒中后神经元的重塑和功能恢复,还有小胶质细胞来源的微囊泡有调节神经元兴奋性的报道等。
bv2细胞复苏实验步骤:
1.从零下80℃冰箱或者液氮罐中取出冷冻管,迅速投入37℃水浴中,使其融化(1分钟左右)。
2.培养基缓慢稀释至原体积的10倍以上。
3.1低速离心10分钟,吸去上清,加入新鲜的培养基培养刚复苏的细胞。
3.2六个小时细胞*贴壁后吸去含有冻存液的培养基并换成*培养基。
bv2细胞传代实验步骤:
1.取密度80%左右的Hela细胞,吸去旧的培养基,用PBS或者Trypsin消化液润洗细胞以减少残留的血清对Trypsin的抑制作用。
2.吸去PBS或者Trypsin,加入Trypsin消化液,于37℃消化2~4分钟,于倒置显微镜下观察,当细胞之间出现间时或者变圆时,吸掉Trypsin 消化液。(也可以直接加入适量含血清的新鲜培养基终止Trypsin的消化作用并进行吹打分离细胞,消化细胞时应静置以避免漂浮的细胞滚动成团)
3.加入适量新鲜培养基,用移液器上下吹打数次打散细胞团块以尽可能形成单细胞悬液,吹打均匀后,按照稀释比例转移至新的培养瓶中,补充*培养基并以正常培养条件培养。