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细胞系(或株)的鉴定和管理

发布时间:2022-02-11浏览:265次

①对已建立细胞系的鉴定:要求能提供细胞的一般和特殊的生物学性状指标。一般特性指标包括:细胞的一般形态、特异性结构、细胞生长曲线和分裂指数、倍增时间、接种率、染色体分析、同工崩检查、DNA指纹图谱等。特异性指标常依据细胞种类和功能的特异性进行鉴定,比如,若为腺细胞则一般鉴定是否有特殊产物包括分泌蛋白或激素产生;若为肿瘤细胞还应能够证明细胞确系来源于肿瘤组织而非其他,并仍保留有肿瘤组织的特性,为此常需做集落形成实验、裸鼠致瘤实验以及对正常组织的侵袭实验等。
a.正常细胞系的鉴定:鉴定细胞的种系来源,常用方法主要有染色体分析、同工酶分析、DNA指纹图谱等技术;鉴定细胞的组织来源,可通过形态学手段、检测组织特异性抗原等进行鉴定;细胞是否发生转化和恶变,主要通过核型分析、细胞生长行为观察(是否丧失接触物制)、裸鼠成瘤实验等进行鉴定;细胞有无发生交叉污染,主要通过同工酶及DNA指纹图谱技术进行鉴定。
b.肿瘤细胞系的鉴定:对肿瘤细胞系的鉴定主要围绕其恶型性展开,染色体的异常、接触抑制和密度依赖生长特性的改变、集落形成能力、裸鼠成瘤、动物体内的侵袭生长,以及某些基因、分子水平的特征均是肿瘤细胞鉴定的方法。
②已建立细胞系的管理:对已建立的和经过鉴定的细胞系,一般除保留在建立者的实验室外,为了科研交流的方便和保证细胞系的稳定性,国际上通行的惯例是将其保存在细胞库中。在国际上,美、英和日本等国已建有细胞库。其中,美国的ATCC(American type culturecollection)是美国国立癌症研究所(NCI)和美国卫生研究所中(NIH)的细胞资源库,也是世界卫生组织(WHO)的国际培养细胞文献中心。同时,ATCC不仅是美国也是世界上较大的细胞库,现存细胞系超过3200种。ATCC接纳来自世界各国已经鉴定的细胞予以储存,同时也向世界各国的研究者或实验室免费提供研究用细胞。

 

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