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293T(人胚肾细胞)

简要描述:293T(人胚肾细胞)是293T细胞株的衍生株,293T是293 [HEK-293]细胞株插入了SV40 T-antigen的温度敏感基因形成的高转衍生株。293T细胞进行克隆,检测pBND和pZAP载体,得到—株能生成高滴度感染逆转录病毒的衍生株293T细胞。293T细胞持续表达猿病毒40(SV40)大T抗原,而因其高转染能力筛选到17号克隆。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2021-03-17
  • 访  问  量:221

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详细介绍
品牌自营品牌供货周期现货
应用领域生物产业
一、细胞基本属性
细胞名称人胚肾细胞
细胞别称293T
细胞货号SNL-015
细胞种属
生长情况贴壁
培养条件H-DMEM+10%FBS+1%双抗
培养环境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期2-3天
培养基体积T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格200-300万/ml,1ml每管
冻存方法1. 离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3. 将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:
1.细胞贴壁较弱,消化时间偏短,注意控制消化时间;
2.T25瓶细胞发货易漂浮成团,收货若成团按收货处理规定进行;
3.细胞培养时可能会有部分黑点,属正常现象,具体原因参见培养操作说明2、3条;

我们推荐使用尚恩生物293T(人胚肾细胞)zhuan用完全培养基(产品货号:SNLM-015)作为体外培养293T(人胚肾细胞)的培养基。

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