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HT-29(人结肠癌细胞)

简要描述:HT-29(人结肠癌细胞)是由JFogh在1964年用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离的;近来,已建株的培养细胞用含相同血清McCoy's5A培液培养。HT-29细胞在裸鼠中致瘤,也能在类固醇处理的地鼠中致瘤。HT-29细胞合成lgA、CEA、蛋白绑定TGF-3的分泌成分和粘液素等。

  • 产品型号:SNL-069
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2021-04-09
  • 访  问  量:48

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详细介绍
品牌自营品牌货号SNL-069
规格T25供货周期现货
主要用途科学研究应用领域生物产业

一、细胞基本属性
细胞名称:HT-29(人结肠癌细胞)
细胞货号:SNL-069
细胞种属:人
生长情况:贴壁
培养条件:McCoy’s 5a+10%FBS+1%双抗
培养环境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期:2-3天
培养基体积:T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例:1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法:
1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项:不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格:200-300万/ml,1ml每管
冻存方法:
1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项:冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案
Tips:

细胞培养时黑点可能会比较多,具体原因参见培养操作说明2、3条;

我们推荐使用尚恩生物HT-29(人结肠癌细胞)完全培养基(产品货号:SNLM-069)作为体外培养的培养基。

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