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大鼠心肌成纤维细胞

简要描述:尚恩生物依托国际化的先进技术及多年专业化的原代细胞分离培养经验,能够为您提供高品质的原代细胞、原代细胞提取物定制服务。集结丰富经验的人才,并配备了整套高新技术实验设备,全程自主研发,严控开发流程,保障产品质量,紧抓售后服务,可以提供高质量的大鼠心肌成纤维细胞。已与国内外多家科研单位、药企、以及医院等建立了良好的合作关系,成为生物医药行业的诚信伙伴和坚强后盾。

  • 产品型号:SNP-R009
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2022-01-11
  • 访  问  量:91
详细介绍
品牌自营品牌货号SNP-R009
规格T25瓶供货周期现货
主要用途实验应用领域生物产业

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一、细胞基本属性

货号:SNP-R009

产品名称:大鼠心肌成纤维细胞

物种:大鼠

组织来源:心脏组织

细胞简介:该细胞分离自心脏组织;心脏由心肌细胞和非心肌细胞组成,非心肌细胞占细胞总数的70%,其中90%以上的非心肌细胞由心肌成纤维细胞组成。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的心肌成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。近年来,人们逐渐了解到非心肌细胞不仅对心肌细胞具有结构上的支持、保护作用,而且还具有自分泌和旁分泌功能,影响心肌细胞的结构和生理功能;心肌成纤维细胞主要功能为对心肌细胞起结构支持作用并负责细胞基质外的合成,当心肌损伤时能产生旁分泌生长因子。心肌成纤维细胞是心脏结缔组织中最常见的细胞,可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质,并且在外伤等因素刺激下,部分纤维细胞可重新转变为幼稚的成纤维细胞,其功能活动也得以恢复,参与组织损伤后的修复。因此,对心肌成纤维细胞的生理学研究成为现代心血管领域研究的一个重点。

方法简介:采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶。

配套体系:成纤维体系

发货形式:T25瓶(1×106左右)

规格:5×10^5cells/T25瓶

培养条件:具体培养条件详询尚恩生物细胞培养技术专员

培养环境:37℃,5%二氧化碳

我们推荐使用尚恩生物大鼠心肌成纤维细胞专用完全培养基(产品货号:SNP-R009)作为体外培养的培养基。


二、细胞培养操作

换液周期2-3天
培养基体积T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法1.尽量吸干净T25瓶原培养基
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右,轻轻晃动培养瓶以使铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项不同品牌消化时间差别较大,注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。


三、细胞冻存操作
冻存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格200-300万/ml,1ml每管
冻存方法1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案


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