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小鼠椎间盘纤维环细胞

简要描述:尚恩生物依托国际化的先进技术及多年专业化的原代细胞分离培养经验,能够为您提供高品质的原代细胞、原代细胞提取物定制服务。集结丰富经验的人才,并配备了整套高新技术实验设备,全程自主研发,严控开发流程,保障产品质量,紧抓售后服务,可以提供高质量的小鼠椎间盘纤维环细胞。已与国内外多家科研单位、药企、以及医院等建立了良好的合作关系,成为生物医药行业的诚信伙伴和坚强后盾。

  • 产品型号:SNP-M179
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2021-12-23
  • 访  问  量:44
详细介绍
品牌自营品牌货号SNP-M179
规格T25瓶供货周期现货
主要用途实验应用领域生物产业

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一、细胞基本属性

货号:SNP-M179

产品名称:小鼠椎间盘纤维环细胞

物种:小鼠

组织来源:椎间盘组织

细胞简介:该细胞分离自椎间盘组织;椎间盘是位于脊柱两椎体之间,由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板,是透明软骨复盖于椎体上,下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成,位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠,使纤维环成为坚实的组织,能承受较大的弯曲和扭转负荷。纤维环的前侧及两侧较厚,而后侧较薄。纤维环的前部有强大的前纵韧带,后侧的后纵韧带较窄、较薄。纤维环细胞密度为9000个细胞/mm3,其外层的细胞呈梭型,主要属于纤维细胞,内层细胞呈圆形,主要属于软骨细胞。在培养的情况下,用透射电镜观察则有许多共同的超微结构表现,它们的核较圆,核仁较明显。细胞质内可见大量的附有核糖体颗粒的粗面内质网和滑面内质网。细胞质内线粒体多,为椭圆形,有的可看到双层单位膜,由单位膜包绕初级深酶体和次级深酶体。细胞质内有一系列的扁平囊及小泡主成的高尔基复合体和分泌颗粒,纤维环细胞合成分泌蛋白多糖及胶原纤维的能力很旺盛,保证纤维环生理代谢活动所需的构造物质的供给。一但这种供给减少,纤维环的生物性能就会减弱,椎间盘开始退变。

方法简介:采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶。

配套体系:软骨体系

发货形式:T25瓶(1×106左右)

规格:5×10^5cells/T25瓶

培养条件:具体培养条件详询尚恩生物细胞培养技术专员

培养环境:37℃,5%二氧化碳

我们推荐使用尚恩生物小鼠椎间盘纤维环细胞专用完全培养基(产品货号:SNPM-M179)作为体外培养的培养基。


二、细胞培养操作

换液周期2-3天
培养基体积T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。


三、细胞冻存操作
冻存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格200-300万/ml,1ml每管
冻存方法1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案


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