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小鼠角膜上皮细胞

简要描述:尚恩生物依托国际化的*技术及多年专业化的原代细胞分离培养经验,能够为您提供高品质的原代细胞、原代细胞提取物定制服务。集结丰富经验的人才,并配备了整套实验设备,全程自主研发,严控开发流程,保障产品质量,紧抓售后服务,可以提供高质量的小鼠角膜上皮细胞。已与国内外多家科研单位、药企、以及医院等建立了良好的合作关系,成为生物医药行业的诚信伙伴和坚强后盾。

  • 产品型号:SNP-M090
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-04-20
  • 访  问  量:638
详细介绍
品牌其他品牌货号SNP-M090
规格T25瓶供货周期现货
主要用途实验应用领域生物产业

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一、细胞基本属性

货号:SNP-M090

产品名称:小鼠角膜上皮细胞

物种:小鼠

组织来源:眼角膜组织

细胞简介:该细胞分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。其主要功能如下:①角膜是无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能,分三层细胞层,外层即是上皮细胞;②角膜上皮细胞能参与先天性免疫,能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统;③角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段,常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。

方法简介:采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶。

配套体系:上皮体系

发货形式:T25瓶(1×106左右)

规格:5×10^5cells/T25瓶

培养条件:具体培养条件详询尚恩生物细胞培养技术专员

培养环境:37℃,5%二氧化碳

我们推荐使用尚恩生物小鼠角膜上皮细胞专用*培养基(产品货号:SNPM-M090)作为体外培养的培养基。


二、细胞培养操作

换液周期2-3天
培养基体积T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法1.尽量吸干净T25瓶原培养基
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右,轻轻晃动培养瓶以使铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未*脱落时加2-3ml*培养基终止消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的*培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足*培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项不同品牌消化时间差别较大,注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。


三、细胞冻存操作
冻存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%*培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格200-300万/ml,1ml每管
冻存方法1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案


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